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2022年05月27日 星期五

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一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法

来源:云南林业和草原技术推广网 时间:2020-08-17 14:13:47 阅读1195 次
专利类型:发明授权
申请(专利)号:cn201811413799.1
申请日:2018-11-26
授权公布号:cn109496849b
授权公告日:2020-07-28
申请人:
地址:562400 贵州省黔西南布依族苗族自治州兴义市下五屯峰林东路1号
发明人:
分类号:a01h4/00
主分类号:a01h4/00
国省代码:52
页数:7
代理机构:贵州派腾知识产权代理有限公司
代理人:谷庆红
主权项:
1.一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)外植体的采集:在澳洲坚果成年树生长萌芽期,用消毒过的剪刀截取枝条上健康且无病虫害带芽的茎段为外植体,茎段长5~10cm,直径0.1~0.2cm;(2)外植体预处理:将上述选好的长茎段迅速带回室内,去掉叶片,用消毒过的剪刀剪成3~4cm长段,置于干净的容器中,于自来水下流水冲洗30~60min;(3)消毒:将上述预处理后的茎段置于灭菌过的超净工作台上,采用消毒剂a处理20~40s,然后用消毒剂b处理8~12min,最后用无菌水冲洗3~5次,每次冲洗4~6min;所述消毒剂a为吐温20按照2滴/500ml的量加入到酒精中混合而成;所述消毒剂b为吐温20按照2滴/500ml的量加入到浓度为0.05~0.15%的升汞中混合而成;(4)接种:用灭菌手术剪将上述消毒过的长茎段两端各剪掉0.4~0.6cm,然后将剩余的长茎段切成长度为0.8~1.2cm的带腋芽茎段,接种到培养基;(5)培养:将上述接种后的培养基放置在无菌培养室中进行恒温暗培养,培养温度为25~28℃,湿度65~75%;所述培养基为ms 0.5~2.0mg/l6-ba, 0.1~1.0mg/lnaa, 25~35g/l蔗糖、 5~10g/l琼脂,混合后的培养基ph调节至5.8~6.0。
摘要:
本发明属于澳洲坚果栽培技术领域,尤其是一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法,通过外植体的采集、外植体预处理、消毒、接种、培养共五个步骤,通过本发明方案处理,使得外植体污染率为5%以下,愈伤组织诱导率达到96%以上,能够在短期内获得愈伤组织和再生芽,愈伤组织可以作为无菌芽的诱导材料,不需要进行消毒处理,再生芽生长较快,不容易出现细胞组织坏死情况。
查看法律状态  2020-07-28 授权 授权
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